【摘要】 目的:探討涎腺導管癌(SDC)臨床及病理學特點，為臨床診斷和治療提供依據(jù)。方法:對昆明醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院2001年3月-2009年2月收治的8例SDC患者進行臨床資料回顧分析，并用免疫組織化學方法檢測SDC組織中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、細胞角蛋白(CK)、巨囊性病液體蛋白(GCDFP)-15、雄激素受體(AR)、癌基因C-erBb-2的表達情況。結果:SDC好發(fā)于腮腺，術前多有面癱表現(xiàn)，復發(fā)3例。計算機斷層掃描示界限不清，可伴有類結晶形成。VEGF、CK、GCDFP-15及C-erBb-2均呈陽性表達，多數(shù)病例AR呈陽性表達。結論:SDC是一類惡性程度很高的涎腺腫瘤，類似乳腺導管癌。GCDFP-15、AR及C-erBb-2對SDC的病理學診斷有較重要的參考價值。

【關鍵詞】 臨床特點 病理特點 涎腺導管癌

涎腺導管癌(salivary duct carcinoma，SDC)惡性程度高，對放化療不敏感，臨床療效不佳，常發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移，多數(shù)患者3年內(nèi)死亡^①。其發(fā)病率較低，直至90年代才逐漸為病理學家所認識。為進一步了解該病的臨床及病理特點，指導臨床診斷和治療，本研究對昆明醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院2001年3月-2009年2月收治的8例SDC患者進行臨床資料回顧分析，采用免疫組化法檢測血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、細胞角蛋白(cyto-keratin，CK)、巨囊性病液體蛋白(grossystic disease　fluid protein，GCDFP)-15、雄激素受體(androgen receptor，AR)、癌基因C-erBb-2在SDC中的表達及其與臨床病理的關系，探討SDC復發(fā)和轉(zhuǎn)移機理。

1 材料和方法

1.1 臨床和病理資料

資料為2001年3月-2009年2月于昆明醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院就診的8例SDC患者，病例均由2位病理科醫(yī)師證實。其中男7例，女1例;年齡為31～80歲，平均49.6歲。其中5例發(fā)生于腮腺，2例發(fā)生于頜下腺，1例發(fā)生于腭部。觸診腫塊質(zhì)地較硬，表面呈結節(jié)狀，周界不清，固定，可伴神經(jīng)受累癥狀。術前計算機斷層掃描或磁共振檢查顯示腫瘤多呈軟組織高密度結節(jié)影，與周圍組織分界不清，可有鈣化形成。術后標本剖開時有沙粒樣感，較硬，剖面呈灰白色，伴有壞死組織，有米粒大小珍珠樣結晶物形成。病理資料為昆明醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院病理科保存的8例SDC患者術后標本。

1.2 蘇木精-伊紅和免疫組織化學染色組織塊作4μm切片，常規(guī)蘇木精-伊紅(hema-toxylin-eosin，HE)染色。取4μm切片供免疫組織化學染色。一抗為即用型單克隆抗體, VEGF、CK(廣譜)、GCDFP-15、AR、C-erBb-2抗體及即用型快捷MaxvisionTM檢測試劑盒均由福建邁新生物公司提供。按照試劑說明進行操作。切片用3%H2O2室溫孵育10min，預處理2min。加入一抗，4℃冰箱中過夜，PBS沖洗。加入抗小鼠IgG多聚體二抗，室溫孵育30min，PBS沖洗。DAB溶液顯色，沖洗，蘇木復染，脫水，透明，封片。

全部切片均由病理醫(yī)師在光鏡下進行評價。VEGF、CK、GCDFP-15的表達以胞漿呈清晰棕色為陽性;C-erBb-2的表達以胞膜呈清晰棕色為陽性;AR的表達以胞核呈清晰棕色為陽性。隨機在高倍鏡下選擇5個視野，計數(shù)1000個細胞中陽性細胞百分率。陽性細胞數(shù)少于25%為弱陽性(+)，25%～50%為陽性(++)，大于50%為強陽性(+++)。

2 結果

8例SDC患者的臨床情況見表1。

光鏡下見腫瘤細胞排成團塊狀、條索狀，細胞巢呈實質(zhì)性、篩孔狀或乳頭狀，向周圍軟組織內(nèi)浸潤，瘤細胞中央形成粉刺樣壞死。瘤細胞為立方形或多邊形，胞體較大，胞質(zhì)豐富，嗜酸性，細胞核大，異型性明顯，病理性核分裂多見。腫瘤間質(zhì)纖維結締組織部分區(qū)域呈玻璃樣變，有淋巴細胞浸潤，部分標本中可見腫瘤細胞侵及血管和神經(jīng)(圖1)。圖1SDC組織內(nèi)細胞排成團塊狀或篩孔狀HE × 400

按照試劑的說明進行免疫組織化學染色，并觀察染色后的結果，具體情況見圖2～6。免疫組織化學染色的結果顯示，在所有選取的SDC患者的組織標本中，VEGF、CK、GCDFP-15、C-erBb-2均為陽性表達，其中5例AR為陽性表達，其余3例AR無表達。圖2 SDC組織胞質(zhì)中VEGF呈陽性表達免疫組化×400圖3SDC組織胞質(zhì)中CK呈陽性表達免疫組化×100圖4SDC組織胞核中AR呈陽性表達免疫組化× 400圖5SDC組織胞質(zhì)中GCDFP-15呈陽性表達 免疫組化 × 400圖6SDC組織胞膜中C-erBb-2呈陽性表達免疫組化×400

3 討論

1990年在WHO公布的涎腺腫瘤組織學新分類中將SDC正式列為一種獨立的腫瘤。SDC由涎腺導管分泌管或由多形性腺瘤分泌管惡變而來，屬高度惡性涎腺腫瘤，發(fā)病率較低，因其組織學表現(xiàn)與乳腺導管癌極為相似，因此而得名。術前影像學顯示腫瘤多呈軟組織高密度結節(jié)影，與周圍組織分界不清，可有鈣化形成。術中見腫瘤邊界不清，質(zhì)地較硬，術后標本剖開時有沙粒樣感，剖面呈灰白色，伴有壞死組織，有珍珠樣結晶形成。上述這些特點可幫助臨床診斷。組織學表現(xiàn)為粉刺樣、乳頭狀、篩孔狀和實性型4種形態(tài)，不同組織學形態(tài)可在同一腫瘤中以不同比例混合存在。腫瘤細胞體積較大，呈大的多角形，胞漿嗜伊紅、核大濃染、核異型性明顯，為多邊形，不規(guī)則，細胞核大，病理性核分裂可見，腫瘤間質(zhì)為纖維結締組織，部分區(qū)域呈玻璃樣變。

SDC雖然發(fā)病率較低，但其在組織學上十分類似于乳腺導管癌，因此在排除乳腺癌涎腺轉(zhuǎn)移的情況下病理學診斷并不困難。而晚期乳腺癌也易于發(fā)生全身轉(zhuǎn)移，甚至轉(zhuǎn)移到腮腺、頜下腺，在涎腺、乳腺之外的部位出現(xiàn)類似乳腺導管癌結構時，免疫組化結合病史多可確診^②。也正是由于本病與乳腺導管癌在病理上非常相似，有人對AR在SDC的表達進行了研究，發(fā)現(xiàn)AR在多數(shù)SDC中高表達，而在其他涎腺良性腫瘤中均為陰性^③④。本研究中患者有5例AR抗體胞核陽性高表達，呈黃褐色，另3例AR無表達。AR表達可能說明SDC與內(nèi)分泌有關，但多數(shù)研究表明該腫瘤多不表達雌激素受體(estrogen receptor， ER)，只有少數(shù)表達ER⑤。SDC與內(nèi)分泌功能是否有關以及能否使用如乳腺癌的內(nèi)分泌療法還需要進一步研究探討。CK、VEGF胞漿染色，呈黃褐色陽性顆粒彌漫分布于胞質(zhì)內(nèi)。CK是上皮細胞主要的結構蛋白和分化的標志產(chǎn)物，主要存在于上皮細胞中，也是其特異性表達蛋白，CK表達均為陽性，說明腫瘤是上皮性來源。VEGF能特異性地與血管內(nèi)皮細胞受體結合，促進內(nèi)皮細胞分裂、增殖和血管構建，從而促進新生血管的生成，使腫瘤細胞通過血管獲得大量的氧和養(yǎng)料，實現(xiàn)腫瘤細胞的指數(shù)增殖。此外VEGF還能增加新生血管的通透性，協(xié)助癌細胞進入血液并轉(zhuǎn)移到其他組織，使腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移^⑥。SDC中VEGF表達提示針對VEGF及其受體的靶向治療可能減少腫瘤血管形成，抑制腫瘤細胞增殖。但目前VEGF的作用機制尚不十分明確。其次，長期使用是否會產(chǎn)生不良反應，還有待進一步研究。C-erbB-2(HER2/ Neu)是表皮生長因子受體家族成員之一，編碼相對分子質(zhì)量為185 000的跨膜糖蛋白，與基質(zhì)來源的其他生長因子結合成異源二聚體，對細胞和組織的增殖和分化起一定的調(diào)節(jié)作用，突變后結構改變導致過度表達，產(chǎn)生大量生長因子或生長因子受體，增強有絲分裂，促使腫瘤發(fā)生。有研究表明原癌基因C-erbB-2在口腔鱗狀細胞癌中存在過度表達，其表達程度越高，提示腫瘤的惡性腫瘤程度越高，越容易發(fā)生轉(zhuǎn)移或局部浸潤^⑦。Silva等^⑧對比正常上皮、過度角化上皮、異常增生上皮及口腔癌上皮研究發(fā)現(xiàn)，在輕度、中度至重度增生中，C-erbB-2的表達強度及數(shù)量相應遞增。說明腫瘤從正常上皮到癌變的過程中C-erbB-2的表達呈增強趨勢，原癌基因C-erbB-2在上皮細胞分化過程中起著重要作用^⑨。本組結果顯示C-erbB-2蛋白在SDC中均呈陽性表達，可能與SDC發(fā)生、發(fā)展、預后密切相關。但到目前為止，對于癌基因和抑癌基因在腫瘤形成中的作用機制和相互關系尚不完全清楚，需要進一步研究。GCDFP-15來自于巨囊性病液體蛋白家族，是大汗腺上皮的特異性組織標志物^⑨⑩來有學者認為GCDFP-15可用于SDC的標準性病理學診斷^①④⑤。本研究SDC組織中GCDFP-15均呈陽性表達，符合SDC的特征。

本研究對SDC臨床及病理學特點進行探討，有助于指導臨床和病理學上對該腫瘤的診斷。同時有助于評估腫瘤的生物學行為及預后，為指導治療和提高療效提供依據(jù)。

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